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Clonación molecular y caracterización de proteínas de membrana externa de Aeromonas veronii : su implicación en adhesión y su potencial como vacunas de adn para peces
Roberto Carlos Vázquez Juárez
Felipe de Jesús Ascencio Valle
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
Proteínas de membrana externa, vacunas de ADN, Aeromonas spp., adhesión, porinas, clonación, peces, respuesta inmune
Outer membrane proteins, DNA vaccines, Aeromonas spp., adhesion, porins, cloning, fish, immune response
"Las Aeromonas móviles (A. veronii, A. hydrophila y A. caviae) son de las bacterias más comunes en ambientes acuáticos en todo el mundo. Con mayor frecuencia se han identificado como el agente etiológico de la septicemia hemorrágica bacteriana y otras condiciones ulcerativas en peces cultivados. Por otra parte, estas bacterias han sido implicadas en gastroenteritis y una variedad de infecciones extraintestinales en humanos. Por lo tanto, además de impactar negativamente en la industria del cultivo de peces, representan un riesgo en salud humana. La vacunación se ha establecido como un método efectivo para la prevención de enfermedades infecciosas de peces cultivados; sin embargo, actualmente no existen vacunas disponibles contra las Aeromonas móviles. La habilidad de un patógeno para adherirse y subsecuentemente infectar un hospedero susceptible es un paso primordial en el desarrollo de la enfermedad. Por ende, aquellas moléculas de adhesión producidas por las bacterias patógenas son importantes factores de virulencia y candidatos apropiados para el desarrollo de vacunas. Con la finalidad de diseñar y construir una vacuna efectiva, segura y económica, contra las Aeromonas móviles, la presente tesis se enfocó en tres tareas: A) identificación de proteínas de superficie de A. veronii (adhesinas), implicadas en la adhesión a células epiteliales; B) clonación y caracterización molecular de los genes que codifican para dichas adhesinas y C) construcción de vacunas de ADN con los genes clonados como componentes antigénicos y evaluación de su potencial para la protección de peces contra infecciones por A. veronii. Los principales resultados se resumen en tres partes: 1) Omp38 y Omp48: potenciales adhesinas. Se identificaron dos proteínas de membrana externa (OMPs) de A. veronii de 38 y 48 kDa, que se denominaron Omp38 y Omp48, que mostraron afinidad por componentes de mucosas (mucina y lactoferrina) y por proteínas de la matriz extracelular (colágena y fibronectina). Esta propiedad está comúnmente asociada a adhesinas bacterianas. Anticuerpos policlonales contra Omp38 y Omp48 inhibieron significativamente la adhesión de A. veronii a células epiteliales in vitro, e inhibieron de manera cruzada, la adhesión de otras especies de Aeromonas y Vibrio. Además, Omp38 y Omp48 inhibieron competitivamente la adhesión de A. veronii"
"Motile Aeromonads (A. veronii, A. hydrophila, and A. caviae) are among the most common bacteria in aquatic environments throughout the world. Frequently, these bacteria have been identified as the etiological agents of bacterial hemorrhagic septicemias and other ulcerative conditions in cultivated fish. Furthermore, motile Aeromonads have been implicated in human gastroenteritis and a variety of extra-intestinal infections, including arthritis, meningitis, wound and urinary tract infections, and septicemia. Therefore, in addition to the negative impact in the fish farming industry, these bacteria represent a risk to human health. Although vaccination is established as an effective method for preventing of infectious diseases in cultivated fish, no vaccines against motile Aeromonads are available. The ability of a pathogen to attach to, and subsequently infect a susceptible host is a primary step in the development of disease. Consequently, adhesion factors produced by bacterial pathogens, which facilitate contagion, are important elements in bacterial virulence, and therefore, are suitable targets for vaccine development. For designing and constructing an effective, safe, and economical vaccine against motile Aeromonads, this thesis focused on the following procedures: A) Identification of surface proteins from A. veronii, involved in adhesion of bacteria to epithelial cells (adhesins); B) Molecular cloning and characterization of the genes encoding for adhesins; and C) Construction of DNA vaccines that include the cloned genes as antigenic components and evaluation of their potential to protect fish against A. veronii infections. The main findings are summarized in three parts: 1) Omp38 and Omp48: potential adhesins. Two A. veronii outer membrane proteins (OMP) of 38 and 48 kDa, named Omp38 and Omp48, showed affinity for mucosal components (mucin and lactoferrin) and extracellular matrix proteins (collagen and fibronectin). This binding property is commonly associated with bacterial adhesins. Polyclonal antibodies directed against Omp38 and Omp48 significantly inhibited adhesion of A. veronii to epithelial cells in vitro, and cross-inhibited adhesion of other Aeromonas and Vibrio species. Also, Omp38 and Omp48 competitively inhibited A. veronii adhesion"
Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.
2003-12
Tesis de doctorado
Español
BACTERIOLOGÍA
Versión publicada
publishedVersion - Versión publicada
Appears in Collections:Tesis de Doctorado en Ciencias en el Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturales

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