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http://cibnor.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1001/451| Susceptibilidad a Vibrio alginolyticus y mecanismos de defensa en moluscos bivalvos | |
| ANTONIO LUNA GONZALEZ | |
| Alfonso Nivardo Maeda Martínez | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| Bivalvos; larvas; susceptibilidad; fenoloxidasa; péptidos antimicrobianos; enzimas lisosomales | |
| Los moluscos bivalvos son una fuente importante de alimento y de recursos económicos en México. A pesar de que esta industria es pequeña comparada con la de otros países, tiene un futuro prometedor gracias a un gran número de especies de importancia comercial y a la abundancia de zonas de posible cultivo. Sin embargo, el cultivo de estos organismos marinos no está exento de problemas ya que como ocurre con el camarón y los peces, existen problemas causados por microorganismos, principalmente en los estadios larvarios, que limitan esta actividad Además, existe poco conocimiento sobre los mecanismos de infección de los microorganismos patógenos y los mecanismos de defensa de los moluscos bivalvos, especialmente en los estadios tempranos de su desarrollo. El estudio del sistema inmune requiere ser abordado de manera consistente, para entender las diferencias en la susceptibilidad que existen entre larvas, juveniles y adultos. En el presente trabajo se estudió la susceptibilidad de larvas al ataque de Vibrio alginolyticus cepa APSA2 y los mecanismos de defensa fenoloxidasa, péptidos antimicrobianos y enzimas hidrolíticas en la ostra japonesa Crassostrea gigas, los pectínidos Argopecten ventricosus y Nodipecten subnodosus y el callo de hacha Atrina maura. La susceptibilidad de larvas de estas especies fue investigada retando larvas de 7 días de edad con diferentes concentraciones de V. alginolyticus. Todas las especies fueron susceptibles al ataque del vibrio pero la mayor supervivencia se obtuvo en la ostra japonesa. Los signos de la enfermedad fueron similares a los de la vibriosis descrita en trabajos previos. La actividad de la enzima fenoloxidasa (FO) fue estudiada en homogenizados de larvas y juveniles, y en el plasma y hemocitos de adultos de las cuatro especies. La actividad de la FO no fue detectada en homogenizados de las larvas, pero fue encontrada en el homogenizado de juveniles de C. gigas y N. subnodosus solamente, y en plasma y lisado de hemocitos en todas las especies estudiadas. La enzima encontrada en las dos especies de juveniles no pudo ser activada con los activadores probados, pero fue incrementada significativamente en el plasma de las cuatro especies y en el lisado de hemocitos de N. subnodosus. La activación del sistema proFO por la laminarina fue suprimida en un máximo de 57 % por un cóctel de inhibidores de proteasas en el plasma y lisado de hemocitos de todas las especies [...] The susceptibility of larvae of Crassostrea gigas, Argopecten ventricosus, Nodipecten subnodosus, and Atrina maura to Vibrio alginolyticus strain APSA2 was investigated by challenging 7 d old veliger larvae with different bacterial concentrations. Larvae of all species were susceptible to vibrio. However, the highest larval survival was obtained in the japanese oyster. Signs of the disease were similar to vibriosis described in a previous work. Phenoloxidase (PO) activity was studied in larval and juvenile homogenates and in the plasma and hemocytes of adults of the four species. PO activity was not detected in larval homogenates but it was present in homogenates of C. gigas and N. subnodosus juveniles. PO activity was present in plasma of all adult species and the activity was enhanced by elicitors in the plasma of all species but only in haemocyte lysate supernatant (HLS) of the scallop N. subnodosus. Activation of proPO by laminarin was suppressed up to 57% by a protease inhibitor cocktail in plasma and HLS of all species tested. The presence of antimicrobial peptides was determined in hemolymph of adult A. ventricosus. The fractions of the first step of purification process (by reverse phase chromatography) were tested to detect antibacterial activity in V. alginolyticus APSA2 and APSA4, V. alginolyticus 138-2, V. parahaemolyticus, V. campbelli, Escherichia coli XL1 Blue, and Micrococcus luteus. The more sensitive bacterium (V. alginolyticus 138-2) was selected as a test organism against the fractions obtained in the purification process. Results of step two show that the hemolymph of A. ventricosus contains 5 fractions with antibacterial activity. Fraction two of step two was utilized to continue the purification process. At the final step, the purity of the fraction with antibacterial activity was ascertained using SDS-PAGE. Two bands of 3.5 and 3.6 kDa were obtained. The activity of hydrolytic enzymes (proteases, glycosidases, phosphatases, and esterases) was studied in oocyte lysate, larval and juvenile homogenates and in adult haemolymph of C. gigas. The presence of enzymes was demonstrated by colorimetric (API ZYM Kit) and lysoplate assay techniques [...] | |
| Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C. | |
| 11-02-2003 | |
| Tesis de doctorado | |
| Español | |
| PATOLOGÍA ANIMAL | |
| Versión publicada | |
| publishedVersion - Versión publicada | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis de Doctorado en Ciencias en el Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturales |
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| luna_a.pdf | Tesis de Antonio Luna González | 357.44 kB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |