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http://cibnor.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1001/3024| Inmortalización de células musculares de humano y lobo marino de California (Zalophus californianus): Efecto en los indicadores de estrés oxidativo | |
| ANDREA CAROLINA MURILLO CISNEROS | |
| TANIA ZENTENO SAVIN | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución-NoComercial-SinDerivadas | |
| Antígeno T, cultivo celular, H2O2, SV40 LT, transformación celular T antigen, cell culture, cellular transformation | |
| "Los mamíferos marinos experimentan ciclos de isquemia y reperfusión tisular durante el buceo, lo cual eleva la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO) y puede llevar a un estado de estrés oxidativo. Gracias a una mayor actividad de las defensas antioxidantes, en comparación con mamíferos terrestres, los mamíferos marinos pueden hacer frente al estrés oxidativo derivado de la isquemia/reperfusión asociada al buceo en apnea. Para avanzar en el estudio de las adaptaciones de mamíferos marinos a condiciones que en mamíferos terrestres conllevan a daño oxidativo, la disponibilidad de células con replicación ilimitada, como los cultivos inmortalizados, podría acelerar significativamente la investigación. La inmortalización celular, prolongación potencialmente infinita de la vida celular, podría facilitar estudios sobre estas adaptaciones. El antígeno T grande del virus de simio 40 (SV40 LT) es una oncoproteína viral que inactiva proteínas regulatorias del ciclo celular, tales como p53 y Rb, y se ha utilizado para inmortalizar células. En este estudio se utilizó SV40 LT para transfectar células musculares de lobo marino de California y humano, se usó puromicina para seleccionar las células inmortalizadas,y se analizaron los indicadores de estrés oxidativo para evaluar el efecto. Aunque la transfección fue exitosa en ambas especies, las células presentaron anomalías morfológicas, períodos variables de viabilidad y muerte celular. Posterior a la transfección, debido a la escasa biomasa, sólo fue posible cuantificar los indicadores de estrés oxidativo en los cultivos de lobo marino de California. La actividad de superóxido dismutasa (SOD) y glutatión S-transferasa (GST) aumentó significativamente (2 y 6.1 veces, respectivamente) en comparación con las células mantenidas bajo condiciones control. En cambio, la actividad de catalasa (CAT) fue mayor en células control (6.9 veces) que en las células transfectadas. Además, el daño oxidativo a proteínas fue significativamente mayor en células transfectadas (3.9 veces) que en las células control. Estos resultados sugieren una acumulación progresiva de peróxido (H2O2), probablemente derivada de un efecto genotóxico provocado por la transfección. Ello podría contribuir a la activación de vías de muerte celular, como apoptosis y necrosis, ya que se observó la pérdida completa del cultivo celular a los 50 días posteriores a la exposición a puromicina..." "Marine mammals experience cycles of tissue ischemia and reperfusion during diving, which increases the production of reactive oxygen species (ROS) and can lead to oxidative stress. Thanks to greater antioxidant defense activity compared to terrestrial mammals, marine mammals can cope with oxidative stress caused by ischemia/reperfusion associated with apnea diving. To advance the study of marine mammal adaptations to conditions that lead to oxidative damage in terrestrial mammals, the availability of cells with unlimited replication potential, such as immortalized cell cultures, could significantly accelerate research. Cellular immortalization, the potentially infinite extension of cellular lifespan, could facilitate studies on these adaptations Simian virus 40 large T antigen (SV40 LT) is a viral oncoprotein that inactivates cell cycle regulatory proteins, such as p53 and Rb, and has been used to immortalize cells. In this study, SV40 LT was used to transfect cells derived from skeletal muscle from California sea lions and humans. Puromycin was used to select immortalized cells, and oxidative stress indicators were analyzed to evaluate the effect. Although transfection was successful in both species, cells exhibited morphological abnormalities, variable viability periods, and eventual cell death. Following transfection, due to limited biomass, it was only possible to quantify oxidative stress indicators in the California sea lion cultures. The activities of superoxide dismutase (SOD) and glutathione S-transferase (GST) increased significantly (2- and 6.1-fold, respectively) compared to cells maintained under control conditions. Conversely, catalase (CAT) activity was higher in control cells (6.9-fold) than in transfected cells. Additionally, oxidative damage to proteins was significantly higher in transfected cells (3.9-fold) compared to control cells. These results suggest a progressive accumulation of peroxide (H2O2), likely caused by a genotoxic effect induced by transfection. This accumulation could contribute to the activation of cell death pathways, such as apoptosis and necrosis, as complete loss of the cell culture was observed 50 days after puromycin exposure. Human cells, with a lower antioxidant capacity, seemed to reach an early saturation of defenses and a more rapid decline..." | |
| Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S. C. | |
| 2025 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| FISIOLOGÍA ANIMAL | |
| Versión aceptada | |
| acceptedVersion - Versión aceptada | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis de Maestría en Ciencias en Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturales |
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| murillo_a TESIS.pdf | Tesis de Maestría de Andrea Carolina Murillo Cisneros | 3.54 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |