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Estado energetico del camaron Litopenaeus vannamei en la respuesta de escape hasta un estado de agotamiento
ARLETT ROBLES ROMO
Ilie Sava Racotta Dimitrov
Acceso Abierto
Atribución-NoComercial-SinDerivadas
carga energética adenílica; estrés oxidativo; Litopenaeus vannamei; metabolismo energético; respuesta de escape
Adenylic energy charge (AEC) [(ATP+0.5ADP)/ATP+ADP+AMP)] participates in metabolic control and regulation and has been used as an indicator of the physiological state under different conditions of acute and chronic stress. Few studies have been done in penaeid shrimp regarding the potential use of AEC; therefore some methodological questions regarding the best way to sample and process are still unanswered. Shrimp exhibit an escape response through consecutive tail flippings in the presence of a potential predator, including human beings. This response is supported by anaerobic glycolysis and phosphagen breakdown that impose a high energy demand to the organism. The objective of this work was to analyze the adjustments of the energetic status of the shrimp Litopenaeus vannamei during escape response until exhaustion. First, we proceeded to implement the analysis of nucleotides and arginine phosphate (ArgP) by HPLC, which implied pertinent methodological adjustments, regarding sample obtention, storage and processing, as well as possible use of anesthesia for shrimp sampling. The effect of different sampling and processing procedures on the AEC and total adenylic nucleotides (NAT) were measured: liquid nitrogen freezing of shrimp versus dissection at room temperature was compared, different cooling methods for sampling, effects of long-term storage at –76 °C, use of three instruments for tissue processing, and effects of optimal and sub-optimal laboratory conditions. In addition, effects of anesthesia (eugenol) and sampling stress per se was analyzed on AEC, ArgP, and metabolic variables. To analyze the energy status of the escape response, shrimp were individually stimulated to elicit a series of abdominal flexions until exhaustion. One group was immediately sampled and another group was allowed to recover for one hour after exhaustion. Different indicators of energy metabolism (adenylic nucleotides, phosphagens, fuels, and oxygen consumption) and oxidative stress (superoxide [O2•−] radical, antioxidant enzymes, and indicators of oxidative damage) were measured.
La carga energética adenílica (CEA) [(ATP+0.5ADP)/ATP+ADP+AMP)] participa en el control y regulación del metabolismo y se ha utilizado como indicador del estado fisiológico ante diferentes tipos de estrés agudos y crónicos. En peneidos se ha estudiado poco este indicador potencial, por lo que se desconocen aspectos metodológicos para su evaluación, como el mejor método de muestreo de los organismos o de procesamiento del tejido para su análisis. La respuesta de escape en los camarones que se presenta ante la presencia de un potencial predador, incluyendo el ser humano, se caracteriza por una serie de flexiones y extensiones del abdomen, y es soportada principalmente por glucólisis anaerobia y fosfágenos que imponen una alta demanda de energía al organismo. El objetivo del presente estudio fue analizar los ajustes en el estado energético del camarón Litopenaeus vannamei en un estado de agotamiento por la respuesta de escape. En primer lugar, se procedió a la implementación de la metodología para la cuantificación de nucleótidos y fosfágenos por HPLC, lo cual implicó ciertos ajustes metodológicos en relación a la obtención, almacenamiento y procesamiento de las muestras así como en la evaluación del posible uso de anestesia para el muestreo de los camarones. .Así, se evaluó el efecto de diferentes procedimientos de muestreo y procesamiento sobre la CEA y los nucleótidos adenílicos totales (NAT): se comparó la congelación del camarón vs la disección a temperatura ambiente, diferentes métodos de enfriamiento para el muestreo, el efecto del tiempo de almacenamiento de muestras a -76°C, el uso de 3 homogenizadores para el procesamiento de tejido, así como el efecto de condiciones de mantenimiento óptimas y sub-óptimas en los organismos. Adicionalmente, se evaluó el efecto de la anestesia (eugenol) y del estrés por el muestreo mismo sobre CEA, ArgP y variables metabólicas. Para el análisis del estado energético en la respuesta de escape, los camarones fueron estimulados de forma individual para que realizaran una serie de flexiones abdominales hasta el agotamiento, después de lo cual un grupo fue muestreado inmediatamente y otro grupo se dejó en recuperación por una hora. Se evaluaron diferentes indicadores del metabolismo energéticos (nucleótidos, fosfágenos, combustibles y consumo de oxígeno) y del estrés oxidativo (radical O2•−, enzimas antioxidantes, e indicadores de daño oxidativo) [...]
Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.
14-03-2014
Tesis de doctorado
Español
FISIOLOGÍA ANIMAL
Aparece en las colecciones: Tesis de Doctorado en Ciencias en el Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturales

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